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柱外體積是液相色譜中死體積重要的組成部分,它包括進(jìn)樣器體積,混合器體積,色譜柱前后連接管路的體積,連接配件等所產(chǎn)生的空間,以及檢測(cè)器流通池體積。根據(jù)您使用的系統(tǒng)和應(yīng)用,在HPLC上開(kāi)發(fā)超高性能方法需要優(yōu)化上述配件以減少柱外體積。測(cè)量柱外體積的方法等度法等度方法的系統(tǒng)體積測(cè)量相當(dāng)簡(jiǎn)單,可以直接在系統(tǒng)上進(jìn)行,而無(wú)需更改流動(dòng)相。首先,取出HPLC色譜柱并用零死體積兩通替換色譜柱。然后以固定流速啟動(dòng)HPLC,并在系統(tǒng)中注入少量丙酮或其他有UV吸收組分,并在270nm或220nm處進(jìn)行...
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高效液相色譜法包括正相色譜和反相色譜兩種,用于分離、定量、鑒定和分析化學(xué)或生物樣品的成分。然而,這兩種方法彼此之間有很大的不同,在大多數(shù)情況下反相HPLC是更好的選擇。在正相HPLC中,樣品的分離是通過(guò)在固定相中使用親水性基團(tuán)(容易溶于水或被水吸收)來(lái)完成的,使極性成分最后被分離出來(lái)。在這種情況下,固定相是極性的,而流動(dòng)相是非極性的。在反相HPLC中正好相反。首先需要去除極性成分,并且在固定相中使用親脂性基團(tuán)(可以溶解在脂質(zhì)、脂肪、油和非極性溶劑中)。在這種情況下,固定相是非...
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手性化學(xué)自發(fā)現(xiàn)以來(lái),在科學(xué)家研發(fā)創(chuàng)新藥物過(guò)程中一直發(fā)揮著舉足輕重的作用。這種描述了分子的三維空間的特征對(duì)色譜分離界產(chǎn)生了革命性的影響,從而誕生了手性化合物對(duì)映異構(gòu)體的HPLC分離技術(shù),即手性色譜法。隨著手性藥物的探索和發(fā)現(xiàn),手性色譜得到了加速發(fā)展和創(chuàng)新進(jìn)步。手性藥物治療作用的出現(xiàn)1848年,法國(guó)科學(xué)家LouisPasteur觀察到天然的酒石酸銨鈉溶液旋轉(zhuǎn)了偏振光平面。而當(dāng)他使用相同的條件檢驗(yàn)合成的酒石酸銨鈉溶液時(shí)候,卻沒(méi)有旋轉(zhuǎn)。后來(lái)他對(duì)樣品進(jìn)一步的分析,注意到這些晶體實(shí)際上有...
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近些年微生物技術(shù)發(fā)展迅猛,在發(fā)酵制藥生產(chǎn)中發(fā)揮的作用也越來(lái)越大,而且對(duì)全丨世界范圍內(nèi)的醫(yī)療事業(yè)和環(huán)境保護(hù)都有著積極意義,成為一種安全有效地生產(chǎn)價(jià)格低廉、純凈的生物制藥的新途徑。發(fā)酵完成后,發(fā)酵產(chǎn)物存在于發(fā)酵液中,包括菌體細(xì)胞、蛋白、糖、水等,提取產(chǎn)物成了一項(xiàng)非常重要的任務(wù),下面分享一下提取發(fā)酵液中產(chǎn)物的一點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。1樣品處理:1.發(fā)酵液調(diào)酸,析出大部分蛋白(產(chǎn)物不怕酸的前提下,也可其他方法除蛋白)2.離心,過(guò)濾,除掉大部分菌體細(xì)胞和蛋白2樣品分析條件:色譜柱:Phenomene...
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微觀世界的分子中,像酮洛芬與自己鏡像不能重合的現(xiàn)象稱(chēng)為手性(chirality),具有手性的分子稱(chēng)為手性分子(chiralmolecule)。其中心碳原子連接有四個(gè)不同的基團(tuán),我們把它叫做手性碳原子,以C*表示。這種互為鏡像又不能重疊的異構(gòu)體,我們稱(chēng)它們?yōu)閷?duì)映異構(gòu)體(簡(jiǎn)稱(chēng)對(duì)映體)圖1.酮洛芬對(duì)映異構(gòu)體“三點(diǎn)相互作用”理論目前,手性識(shí)別模型多是基于Dalgliesh在1952年提出的“三點(diǎn)相互作用”(Three-pointinteraction)理論:在一對(duì)對(duì)映體和手性選擇劑之...
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